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| [ 2-DE 이미지분석 ] 의미있을 것 같은 단백질이 보이는데 어떤 단백질인지 어떻게 알 수 있나요?
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2-DE 이미지를 보고 spot이 어떤 위치에 있다고 해서 그것이 어떤 단백질인지 알 수는 없습니다. 그러므로 이미지 분석을 통해 받으신 결과를 토대로 관심 있는 spot의 번호를 알려주시고 단백질 동정 서비스를 신청하시면 됩니다. 가격은 샘플의 origin이 무엇이며 어떤 동정방법을 사용하느냐에 따라 달라지니 MS분석 FAQ를 참고하시기 바랍니다. |
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| [ 2-DE 이미지분석 ] 이미지 분석 결과를 받았는데, 선정된 후보가 너무 많습니다. 단백질 동정을 위한 후보를 어떻게 selection 하면 되나요?
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반복 실험이 없이 singlicate 분석을 하게 되면 약간의 변화라도 보이는 다수의 spot이 선정 대상이 되는데, 이런 경우 선정된 후보의 수가 일반적으로 매우 많은 것이 특장입니다. 그러므로 샘플과 gel variation의 차이에서 올 수 있는 후보 선정의 오류를 최대한 배제할 수 있는 반복 실험을 하시길 권장해 드립니다. 실제 반복 실험을 하게 되면 선정되는 후보의 개수가 siglicate분석에 비하여 많이 줄어들게 됩니다. 혹, 샘플의 준비가 어렵거나 장기간이 소요되어 반복실험이 여의치 않을 경우에는 spot의 intensity값을 기준으로 계산하여, 증감의 변화폭이 매우 큰 후보들을 기준으로 선택하시면 됩니다. |
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| [ 2-DE 이미지분석 ] 선정해 주신 후보 외에 육안으로 관찰된 다른 spot의 데이터를 받고 싶습니다. 어떻게 요청하면 되나요?
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캡쳐해 드린 상세 이미지에 관심 있는 spot이 화살표 등으로 표시해서 보내 주시면 이미지 분석 프로그램으로 분석 후 데이터를 보내드릴 수 있습니다. |
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| [ 2-DE 이미지분석 ] 결과 Report에서 선정된 spot의 상세 이미지를 어떻게 해석하여 이해하면 되나요?
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Master image에 선정된 spot의 SSP번호가 표시되어 있고 나머지 샘플 image에 선정된 spot이 같은 위치에 보여집니다. 각각의 샘플에서 spot의 발현 차이를 육안으로 확인 하실 수 있습니다. |
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| [ 2-DE 이미지분석 ] 이미지 분석결과에 보면 캡쳐한 match set을 보면 샘플이미지 외에 master image라고 있는데 이것은 무엇인가요?
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의뢰하신 샘플의 젤 이미지 중 한 장을 사용하여 모든 샘플에서 보이는 spot을 관리할 수 있도록 만들어진 가상의 이미지 입니다. 추후에 같은 origin 샘플을 의뢰하실 경우에 이전의 master image를 사용하기 때문에 같은 spot(단백질)일 경우에는 같은 SSP번호가 부여되게 됩니다. |
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| [ 2-DE 이미지분석 ] 결과 Report 에서 첫 이미지 즉, 가로세로 선으로 표시하여 수치를 적어주신 것은 무엇을 뜻하는 것인가요?
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가로축에 표시해드린 것은 pI(등전점)이고, 세로축은 분자량입니다. 대략적인 값으로 생각하시면 됩니다. 정확한 값은 단백질 동정을 통하여 확인하실 수 있습니다. |
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| [ 2-DE 이미지분석 ] 선정해주신 spot 후보들을 젤 이미지 상에 임의의 번호로 표시하고자 합니다. 프로그램을 통해 표시해 줄 수 있나요?
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프로그램을 통해 선정된 후보들을 젤 이미지에 표시하는 것은 가능합니다. 프로그램으로 표시할 경우 선정된 후보가 많을 때에는 인접한 spot의 번호들과 글자가 겹쳐져서 식별이 어려울 수가 있습니다. 그래서 이런 경우는 요청에 따라 번호가 표시되지 않고 단지 빨간색 점으로 표시해 제공해 드릴 수는 있습니다. 그리고 표시되어 제공되는 spot의 번호(SSP:Standard spot)는 프로그램에서 자동으로 고유번호를 부여하기 때문에 의뢰자께서 원하시는 임의의 번호로 지정하여 표시해 드릴 수 없음을 알려드립니다. |
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| [ 2-DE 이미지분석 ] 2-DE 분석에서 A, B, C format은 어떻게 다른 것인가요?
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- A format은 이미지 분석을 통해 선정된 후보들의 분자량 과 pI 값이 제공됩니다. 그리고 선정된 spot들의 상세이미지가 편집되어 제공되어 집니다.
- B format은 A format과 동일하며, 선정된 후보들의 intensity 값이 제공됩니다. 수치로 보여지는 intensity 값은 샘플간 정확한 발현차이를 계산 하는데 유용하게 사용되게 되며, 이를 이용하여 샘플간에 변화율까지 계산하여 제공해 드립니다.
- C format은 B format분석에서 추가되어 다양한 통계적인 분석 결과 등이 제공됩니다. 선정된 후보에서 나온 intensity 값을 이용하여 각 샘플간의 유사성(distance, clustering), 발현변화 패턴의 classification등을 정리하여 해석하기 어려운 복잡한 실험을 이해하기 쉽도록 display해 드립니다. 다만 반복 실험이 없는 singlicate 실험이나, 비교하고자 하는 대상이 비교적 단순한 실험에는 유용하지 않습니다 다만 다양한 처리나 비교하여야 할 샘플수가 많은 실험 등 여러 가지 발현의 패턴을 보시고자 하는 실험에 적합하다고 보시면 됩니다. |
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| [ 2-DE 이미지분석 ] 2-DE 분석후 관찰되는 spot의 개수가 수백여 개에 달하는데 모든 스팟의 변화를 다 비교하여 후보를 선정해 주나요? 어떻게 선정이 이루어 지나요?
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의뢰하신 샘플의 젤 image가 나오게 되면 이미지분석프로그램을 이용하여 match set을 만들면, 프로그램에서 auto-match로 대략적인 match가 이루어집니다. 여기에 추가로 match 되지 않은 일부 spot에 대하여 수작업을 통해 세밀한 이미지 분석이 가능하도록 match 작업을 진행합니다. 그 후 염색된 전체의 spot에 대해 육안으로 비교 분석하여 유의한 변화를 보이는 spot에 대해서만 후보 선정에 들어갑니다. |
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| [ 2-DE 이미지분석 ] 반복실험을 하는 이유가 무엇인가요? 그리고 1차에서 선정되었던 후보들이 재현실험을 했을 때 선정 대상에서 제외된 이유는 무엇인가요?
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같은 샘플이지만 샘플간의 차이등과 2-DE 실험에서 올 수 있는 미묘한 차이 등을 고려하여 반복실험을 거치면서 재현되는 후보만 선정 되었다고 보시면 될 것 같습니다. 반복은 실제 샘플에서 오는 차이만을 반영하기 위해 정확한 후보를 선정하기 위한 것입니다. 실제 반복 실험을 수행하는 것이 선정되는 후보의 수를 줄이고 확실한 후보선정을 위해 무엇보다 중요합니다. |
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